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- 〖A〗、细菌内毒素检测是如何工作的?
细菌内毒素检测是如何工作的?
内毒素检测(凝胶法)是一种用于革兰氏阴性细菌内毒素的限量测试方法。其原理基于内毒素能够催化鲎试剂(LAL)中的酶原活化。初始活化速率由内毒素的浓度决定。活化后的酶(凝固酶)会水解LAL中的凝血蛋白(凝固原)内的特定化合键,产生凝固素。这些凝固素自行联合,形成凝胶状胶块。
细菌内毒素检测过程中,首先需要准备标准品,并将其稀释至1EU/mL的工作浓度。接着,根据实验需求,进一步将1EU/mL的标准品按比例稀释,依次得到0.5 EU/mL、0.25 EU/mL、0.125 EU/mL以及0.0625 EU/mL这四个不同浓度的标准品。
步骤:取内毒素工作标准品一支,用75%酒精棉擦拭安瓿颈,开启,防止玻璃屑落入瓶内。向内毒素工作标准品安瓿内加入1ml内毒素检查用水,在漩涡混合器上混匀15min,制成10EU/ml的内毒素标准溶液。
